紫外-可見分光光度法應(yīng)用
時間:2018-11-27 16:11:19來源:food欄目:檢驗技術(shù) 閱讀:

*酸堿指示劑離解常數(shù)的測定
分光光度法可以測定酸堿離解常數(shù),若為一元弱酸,在溶液中的離解反應(yīng)為:
HB ⇌ H+ + B-
若測出 [B-] 和 [HB],就可算出 Ka。測定時,配制出三份不同 pH 的 HB 溶液,一份為強堿性溶液,另一份為強酸性溶液,分別在 B- 和 HB 的吸收峰波長處測定吸光度,由此計算出 B- 和 HB 的摩爾吸光系數(shù)。第三份為已知 pH 值的緩沖液,其 pH 值在 pKa 附近,在測得 B- 和 HB 的總吸光度后用雙組分測定的方法算出 B- 和 HB 的濃度,即可計算出弱酸的離解常數(shù)。
由 pH = pKa
可知,當(dāng) [B-] 和 [HB] 相等時: pKa = pH
若以 pH 為橫坐標(biāo),以某波長處測得的不同 pH 時的 A 為縱坐標(biāo)作圖,得一條 S 形曲線,該曲線的中點所對應(yīng)的 pH 即為 pK 值。

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